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兔子催乳素 ELISA试剂盒测定结果判定

测定结果判定:

结果判定一般是根据比色结果和肉眼观察综合判定。如在判定过程发现有些反应孔出现倒阴不阳的现象或出现不常见的模式(如乙肝两对半中出现12阳性等),需本着严谨的态度,重新复查。
对ELISA测定中出现问题的可能原因(非试剂盒本身的原因),总结如下: 1)弱阳性质控样本检测不出温育的时间或温度不够;显色反应时间太短;所用配制缓冲液的蒸馏水有问题。
2)测定的重复性差 ,这是由于测定操作引起的问题,包括 ①加样本及试剂量不准;孔间不一致 ②加样过快,孔间发生污染 ③加错样本 ④加样本及试剂时,加在孔壁 ⑤不同批号试剂盒中组分混用 ⑥温育时间、洗板、显色时间不一致 ⑦孔内污染杂物,血清标本未完全凝固即加入,反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血细胞,易出现假阳性等。 3)全部孔都不显色 ① 漏加酶结合物; ② 洗板液配制中出现问题 ③ 漏加显色剂A或B ④ 终止剂当显色剂使用 4)全部板孔均有显色 ① 板不干净 ② 显色液变质 ③ 洗板液受酶等污染

 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
计算以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

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